索4gyrt诱导抗肿瘤免疫反应的机制，我们检测了rt诱导的树突状细胞的激活。4gyrt治疗既没有引起肿瘤细胞死亡，也没有增加支气管淋巴结中cd103+交叉呈递的dc。接下来，我们对接受rt联合igg或pd1抗体治疗的hkp1肺进行rnaseq分析。比较4gyrt组、0gy组和8gyrt组在抗pd1治疗前后的差异表达基因。通过将igg队列中4gyrt上调的基因与抗pd1队列重叠，我们识别了144个特定于该有效辐射剂量上调的基因。为了确定这4个gyrt特征基因的细胞来源，我们对接受0gy或4gyrt的hkp1荷瘤肺进行了单细胞rnaseq分析。通过将144个签名基因投影到t分布随机邻居嵌入图，我们发现这些基因在4gyrt后在气道上皮/棒状细胞簇中显著上调。

棒状细胞分泌体与联合治疗的疗效有关

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无论采用哪种耗竭方法，携带hkp1的肺对4gyrt的免疫反应均明显减弱，表现为t细胞向肿瘤胰岛的浸润显著减弱，效应细胞因子的产生减少。值得注意的是，在hkp1荷瘤小鼠中，棒状细胞缺陷取消了联合治疗的疗效。

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电子显微镜对棒状细胞的进一步表征显示，与对照组相比，从4gyrt治疗的肺中分离出的棒状细胞中分泌囊泡的数量增加。我们推测放疗后棒状细胞的分泌可能在提高icis疗效中起作用。为了解决这个问题，我们使用scgx/flox转基因小鼠阻止棒状细胞分泌蛋白进入肺t。突触体相关蛋白23是snare复合体的关键成分，它介导细胞内囊泡融合到膜上，调节胞吐。他莫昔芬治疗scgb1a1cre/sn23fl/fl小鼠允许有条件的棒状细胞特异性缺失sn23基因，而不改变细支气管的完整性。对支气管肺泡灌洗液的分析证实，与野生型对照相比，4gyrt治疗的scgb1a1cre/sn23fl/fl小鼠的棒状细胞分泌组成分10显著减少。与棒状细胞消融一致，sn23缺乏抑制了hkp1肺对4gyrt反应中t细胞的浸润和激活。

棒状细胞减少促肿瘤炎症

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球状细胞缺陷小鼠的肺显示髓系/淋巴细胞比率增加。此外，杆状细胞缺陷肺中的髓样细胞表现出炎症介质的表达增加，如il1s2和tnf，据报道它们可以抑制适应性抗肿瘤免疫。我们推测这些棒状细胞介导的t改变可能影响了t细胞效应器的表型。使用基于图形的分类，t细胞被分成9个簇，每个簇的功能状态根据它们的特征基因来确定。我们观察到效应t细胞簇显示细胞因子、效应分子和t细胞活化标志物表达增加，增殖t细胞簇显示颗粒酶和ki67表达，调节性t细胞簇显示foxp3和il2ra表达。值得注意的是，与对照组相比，去杆状细胞降低了效应器、增殖t细胞和treg细胞的比率/c。总之，这些scrnaseq结果表明，rt激活的棒状细胞的存在有助于适应性抗肿瘤免疫，可能是通过限制hkp1肿瘤中髓系细胞介导的炎症。y对照组相比，4gyrt显著降低了hkp1t中il1β、p2和tnfα的水平，但在没有棒状细胞或其分泌体的情况下，4gyrt未能减少这些炎症因子。为了证明rt诱导的棒状细胞分泌体的临床相关性，我们在ii期新辅助临床试验54中评估了接受rt联合icis治疗的nsclc患者的血浆水平。分别于首次立体定向全身放射治疗前1d和末次sbrt后1d采集血浆。匹配患者的10血浆浓度比较显示，大多数获得病理改善的患者在放疗后血浆10水平升高，而无反应的患者，表明棒状细胞激活与联合治疗的病理反应有关。综上所述，这些发现表明，rt激活的棒状细胞通过其分泌体抑制了hkp1肺中的肿瘤前炎症，从